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牛胚收集-非外科洗胚
發文日:101/01/16
進行非外科洗胚的最佳時間應於配種後的第 7~8天。
非外科洗胚的方法及步驟如下:
一、直腸觸診黃體數目:
先將供胚牛領入固定架內,技術人員可將一隻手伸入直腸內,觸診卵巢的大小並估算黃體和濾泡的數目。
二、非外科沖洗胚:
將已準備好的洗胚導管前端套上塑膠保護套並於前端塗上 K~Y 潤滑劑後,技術人員把洗胚導管伸入陰道,通至子宮頸管時,將洗胚導管外層塑膠保護套往後拉,使洗胚導管繼續通過子宮頸。當進入子宮體時,調整到選擇的左邊或右邊子宮角上,洗胚導管的氣球正好位於兩邊子宮角分叉位置上,打入10~15ml的空氣使氣球膨脹,正好卡緊子宮襞防止沖洗液從氣球與子宮襞之間隙漏出來。接著將沖洗液回收管往子宮角深部推送,至適當位置。並將沖洗液500ml 左右灌注入子宮內,同時注意沖洗液是否從回收管內流出至量筒內,如此操作直到回收的沖洗液不再流出為止,然後慢慢地將回收導管移至另一邊子宮角上準備繼續沖洗,沖洗的方法同上。經由兩邊子宮角沖洗出的沖洗液收集在 1000ml 的量筒內,於室溫靜置待胚沈降下來。
三、胚的收取及處理
1.在室溫下將裝有回收之沖洗液量筒靜置約 30 分鐘後,用虹吸管將上層的回收沖洗液虹吸至另一空的燒杯內,僅留下底層約 100ml 左右,輕輕晃動後再倒入分裝 10cm培養皿之中,於立體顯微鏡下收取胚。
2.將尋到的胚,以滅菌過的毛細管吸至另一培養皿中清洗十次以上,然後再將每個胚分裝於 0.25ml的麥管中,供新鮮胚移置之用。
非外科洗胚的方法及步驟如下:
一、直腸觸診黃體數目:
先將供胚牛領入固定架內,技術人員可將一隻手伸入直腸內,觸診卵巢的大小並估算黃體和濾泡的數目。
二、非外科沖洗胚:
將已準備好的洗胚導管前端套上塑膠保護套並於前端塗上 K~Y 潤滑劑後,技術人員把洗胚導管伸入陰道,通至子宮頸管時,將洗胚導管外層塑膠保護套往後拉,使洗胚導管繼續通過子宮頸。當進入子宮體時,調整到選擇的左邊或右邊子宮角上,洗胚導管的氣球正好位於兩邊子宮角分叉位置上,打入10~15ml的空氣使氣球膨脹,正好卡緊子宮襞防止沖洗液從氣球與子宮襞之間隙漏出來。接著將沖洗液回收管往子宮角深部推送,至適當位置。並將沖洗液500ml 左右灌注入子宮內,同時注意沖洗液是否從回收管內流出至量筒內,如此操作直到回收的沖洗液不再流出為止,然後慢慢地將回收導管移至另一邊子宮角上準備繼續沖洗,沖洗的方法同上。經由兩邊子宮角沖洗出的沖洗液收集在 1000ml 的量筒內,於室溫靜置待胚沈降下來。
三、胚的收取及處理
1.在室溫下將裝有回收之沖洗液量筒靜置約 30 分鐘後,用虹吸管將上層的回收沖洗液虹吸至另一空的燒杯內,僅留下底層約 100ml 左右,輕輕晃動後再倒入分裝 10cm培養皿之中,於立體顯微鏡下收取胚。
2.將尋到的胚,以滅菌過的毛細管吸至另一培養皿中清洗十次以上,然後再將每個胚分裝於 0.25ml的麥管中,供新鮮胚移置之用。
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