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始基生殖系嵌合鴨
發文日:101/01/17
許多位學者曾利用PGC之轉移來作成家禽之生殖系嵌合動物。由於家禽PGC在由X期胚胎發育至生殖脊之間有在血液中移行之現象,因此可在其移行中將之取出或是將生殖脊之細胞取出並分離PGC再移置到另一胚胎中,而這些被移入之PGC就會隨血流再度移行到生殖脊中,便有機會得到具生殖系嵌合之嵌合體(germline chimera)。如將這些PGC在移入之前先把外源DNA利用各種基因轉殖的方法放入其細胞,再作PGC之注入,則有機會獲得生殖細胞中具有基因轉殖之家禽。首先,將提供始基生殖細胞鴨種,孵化約4~5天的受精蛋,在顯微鏡下自背大動脈採血,並分離出始基生殖細胞,再將這些始基生殖細胞,注入另一隻接受者鴨胚胎(同時孵化至5~6天)的背大動脈,然後進行孵化;另一途徑則是自孵化至7~9天(依鴨種而異)的始基生殖細胞供應鴨胚中取出性腺,分離出始基生殖細胞後,注入另一始基生殖細胞接受鴨的胚胎中再進行孵化。
從始基生殖細胞自胚胎取出,到注入另一鴨胚胎之前,可以進行外源性基因的轉染,而導入所欲得到的外源性基因,經篩選後選取轉染成功的始基生殖細胞,再注入接受鴨胚,以便獲得帶有外源性基因的嵌合鴨。
經上述始基生殖細胞注入而孵化出來的雛鴨,必須將其飼養至性成熟,並以人工配種的方式來測試其是否為生殖系嵌合鴨,亦即所孵出的鴨必須與另一品種的鴨進行人工授精,並以其所孵出的後代來判定該鴨是否為一生殖系嵌合鴨。
正常情況下一隻公正番鴨(Muscovy Duck; Cairina moschata),與母菜鴨配種之後,只會生出土番鴨雛鴨(公正番鴨 × 母菜鴨),但是若能生出菜鴨後代,則表示此公正番鴨的精子中,混有來自菜鴨始基生殖細胞所形成的精子,如此一來即可斷定此一公正番鴨為一生殖系嵌合公鴨。如果它是一母正番鴨,在與菜鴨公鴨配種之後,正常情況下只會生出鴃騠鴨(公菜鴨 × 母正番鴨),但是若能生出純種菜鴨雛鴨,即表示此母正番鴨的性腺已成功嵌入菜鴨的始基生殖細胞,為一生殖系嵌合母鴨。
從始基生殖細胞自胚胎取出,到注入另一鴨胚胎之前,可以進行外源性基因的轉染,而導入所欲得到的外源性基因,經篩選後選取轉染成功的始基生殖細胞,再注入接受鴨胚,以便獲得帶有外源性基因的嵌合鴨。
經上述始基生殖細胞注入而孵化出來的雛鴨,必須將其飼養至性成熟,並以人工配種的方式來測試其是否為生殖系嵌合鴨,亦即所孵出的鴨必須與另一品種的鴨進行人工授精,並以其所孵出的後代來判定該鴨是否為一生殖系嵌合鴨。
正常情況下一隻公正番鴨(Muscovy Duck; Cairina moschata),與母菜鴨配種之後,只會生出土番鴨雛鴨(公正番鴨 × 母菜鴨),但是若能生出菜鴨後代,則表示此公正番鴨的精子中,混有來自菜鴨始基生殖細胞所形成的精子,如此一來即可斷定此一公正番鴨為一生殖系嵌合公鴨。如果它是一母正番鴨,在與菜鴨公鴨配種之後,正常情況下只會生出鴃騠鴨(公菜鴨 × 母正番鴨),但是若能生出純種菜鴨雛鴨,即表示此母正番鴨的性腺已成功嵌入菜鴨的始基生殖細胞,為一生殖系嵌合母鴨。
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