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胚葉細胞轉移嵌合雞
發文日:101/01/17
除利用始基生殖細胞轉移,生產生殖系嵌合體家禽外,另有研究以家禽胚胎發育至X階段的胚葉細胞的轉移,來獲得生殖系嵌合體。將供應胚葉細胞家禽(如土雞)的受精蛋,以無菌濾紙環或微量吸管,吸取胚胎中央透明區部位的胚葉細胞,經處理後進行基因轉殖。將轉殖過的細胞,以微量注入針,注入另一已事先做輻射處理或抽掉部分胚葉細胞的接受者(如來亨雞)的胚盤透明區下腔中,封好蛋殼後繼續孵化,孵出的小雞表型可能為來亨雞毛色,也可能為混有土雞毛色的體細胞嵌合情形,飼養至性成熟後,以人工配種來測試其是否為生殖系的嵌合體。
其測定與上述生殖系嵌合鴨原理相似,當此一來亨雞為生殖系嵌合體時,其所產生的生殖細胞會有兩類,一為具來亨雞遺傳組成的生殖細胞,另一則為具土雞遺傳組成的生殖細胞,當它們與測試用土雞的精子或卵結合時,會有兩種情形的毛色,由於來亨雞白色羽毛的基因型為II,而土雞的毛色則為ii,I基因為不完全顯性,所以Ii(來亨雞與土雞的雜交)則為白色羽毛但會有顏色的斑點。若產生土雞毛色後代,則表示受測試雞為一生殖系嵌合雞,便可以更進一步測定此一土雞雛雞的基因,是否帶有轉殖的外源性基因,而確定是否有基因轉殖。
以胚葉組織進行生殖系嵌合體的產製時,由於胚葉細胞容易取得,短時間內即可完成準備工作,但是若以始基生殖細胞為轉移細胞,在技術上則困難許多,且取得的細胞數量較少,不易作外源性基因的轉殖,或遺傳組成修正處理等操作。由於胚葉細胞可以大量取得,且與螢光激發細胞分離技術配合使用時,可以讓轉染細胞帶有螢光,再經由螢光激發細胞分離儀器分離後,可將帶有螢光的細胞挑選出來,而達到篩選的目的。此一方法與始基生殖細胞的轉移一樣,孵化率皆不高,約在5~15%之間,如果採取體外培養系統,孵化率可提高到30%。
其測定與上述生殖系嵌合鴨原理相似,當此一來亨雞為生殖系嵌合體時,其所產生的生殖細胞會有兩類,一為具來亨雞遺傳組成的生殖細胞,另一則為具土雞遺傳組成的生殖細胞,當它們與測試用土雞的精子或卵結合時,會有兩種情形的毛色,由於來亨雞白色羽毛的基因型為II,而土雞的毛色則為ii,I基因為不完全顯性,所以Ii(來亨雞與土雞的雜交)則為白色羽毛但會有顏色的斑點。若產生土雞毛色後代,則表示受測試雞為一生殖系嵌合雞,便可以更進一步測定此一土雞雛雞的基因,是否帶有轉殖的外源性基因,而確定是否有基因轉殖。
以胚葉組織進行生殖系嵌合體的產製時,由於胚葉細胞容易取得,短時間內即可完成準備工作,但是若以始基生殖細胞為轉移細胞,在技術上則困難許多,且取得的細胞數量較少,不易作外源性基因的轉殖,或遺傳組成修正處理等操作。由於胚葉細胞可以大量取得,且與螢光激發細胞分離技術配合使用時,可以讓轉染細胞帶有螢光,再經由螢光激發細胞分離儀器分離後,可將帶有螢光的細胞挑選出來,而達到篩選的目的。此一方法與始基生殖細胞的轉移一樣,孵化率皆不高,約在5~15%之間,如果採取體外培養系統,孵化率可提高到30%。
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