辨別獨角仙的雌雄主要看頭部與前胸的犄角（成蟲）或腹部特徵（幼蟲）。

成蟲辨別方式

• 雄蟲（公）：頭部前方有一個長大的分叉犄角，前胸背板上也有一枚小犄角。

• 雌蟲（母）：沒有任何犄角，頭部與前胸表面光滑。 

幼蟲辨別方式（三齡幼蟲）

• 雄蟲（公）：翻開腹部內側，倒數第二節中間有兩條白色管線匯集成 V 字型，中央有一個白色小孔。

• 雌蟲（母）：腹部倒數第二節沒有這個 V 字型白色管線與小白點特徵。雄性獨角仙雖具有醒目的頭角與前胸角，雌蟲則沒有這類發達長角。但體色可能因個體而異，不適合作為最可靠的單一辨識依據。