番鴨誘導多能性幹細胞株之建立與水禽小病毒感染測試 - 農業知識入口網

本研究目的為建立番鴨誘導多能性幹細胞（muscovy duck induced pluripotent stem cells, mdiPSCs），並進行水禽小病毒（waterfowl Parvovirus）感染測試，評估此細胞株作為疫苗生產之潛力。試驗利用慢病毒（lentivirus）將LIN28, NANOG, SOX2, OCT3/4, KLF4 和 C-MYC 等轉錄因子轉染番鴨胚胎纖維母細胞（muscovy duck embryonic fibroblasts, mdEFs），經約 7 － 10 天後 mdEFs 逐漸由梭狀轉為圓形之上皮細胞形態，持續培養 35 － 40 天後則形成類似幹細胞群落形態。mdiPSCs 體外培養已超過 45 繼代（380 天），經分化多能性細胞標誌 AP 與 PAS 染色後呈現陽性反應；使用懸浮小滴培養技術培養，具有形成類胚體（embryoid body）能力；顯示所建立之番鴨誘導多能性幹細胞具有分化多能性與分化潛能。以聚合酶連鎖反應進行檢測，證實經水禽小病毒直接感染後之 mdiPSCs，及經病毒感染 mdiPSCs 之回收細胞液共培養的 mdiPSCs，結果均呈陽性反應，證實水禽小病毒可感染本研究所建立的mdiPSCs，並可以在其細胞內順利複製病毒顆粒，顯示本研究所建立的 mdiPSCs 可作為水禽小病毒宿主細胞及具疫苗生產的潛力。