蘇力菌台灣株B11-30a之營養期殺蟲基因vip3Aa的選殖與表現 - 農業知識入口網

分離自台灣各地穀倉之111個蘇力菌菌株，利用vip3A基因特異性引子，進行1.1 kb片段的PCR篩選，獲得66%的篩獲率。由菌株B11-30a選殖vip3A相關基因，並進行基因的定序及比對，所得之2,370 bp的vip3A相關基因，與已發表之vip3Aa15具有99.4%同源性，推測是vip3Aa類型基因。轉譯後之胺基酸序列，與Vip3Aa15有7個胺基酸的差異，顯示本基因應該具有地區獨特性，且非因境外移入所產生。選殖此vip3Aa基因至pQE82蛋白質表現載體，進行IPTG的誘導及表現培養，經蛋白質電泳及西方墨點法分析，顯示vip3Aa基因，在大腸桿菌宿主中，可受IPTG誘導及表現，產物約為88 kDa。可能由於表現量不高、形成包涵體（inclusion bodies）導致蛋白質立體結構錯誤的摺疊，或胺基酸序列的些微差異，造成本研究之Vip3Aa蛋白質產物，對於小菜蛾（Plutella xylostella）、擬尺蠖（Trichoplusia ni）、斜紋夜盜（Spodoptera litura）及甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）幼蟲的生物活性試驗，均不具明顯的殺蟲效果。