2012年有機農業研究團隊研發成果研討會--昆蟲寄生真菌座殼菌(Aschersonia aleyrodis)防治銀葉粉蝨評估-座殼菌生理特性探討
(一)pH值對A. aleyrodisNP001之影響
本試驗將馬鈴薯葡萄糖洋菜培養基(potato dextrose agar)調整為pH4.5~pH9.5,並測試對A. aleyrodis NP001的發芽率影響。其中未經調整pH值的PDA為pH5.4,而A. aleyrodis NP001分生孢子在pH5.4, 6.5及7.5之條件下,接種第16小時,即具有超過95%的發芽率。而接種於pH4.5及8.5的條件下,在第16小時則約有將近70%的發芽率,在pH9.5中則為25%。雖然在pH4.5及8.5條件下16小時之發芽率略低於pH5.4~7.5的發芽率,但在pH4.5及8.5中培養至24小時,其發芽率也都已超過95%。於pH9.5的條件下,持續觀察至63小時,孢子發芽率亦可達到90%。由結果顯示出,A. aleyrodis NP001的孢子可耐受的pH範圍介於pH4~9.5之間,偏酸或偏鹼之環境雖會造成發芽時間較為延遲,然而,當培養時間拉長時,仍可達到相當高之發芽率。在Ibrahim等人1993年測試A. placentap分生孢子於H3.0~9.0的培養條件下第24小時的發芽率,以pH5的79%最佳,pH4及pH6的發芽率皆為61%,而pH3及pH9則分別為42%及44%。以我們的觀察結果與Ibrahim等人1993年的報導相比較,雖可發現兩者在各個pH值下發芽率不盡相同,但是Aschersonia對於pH值耐受性的趨勢是相似的。另外,在本試驗將A. aleyrodis NP001接種於pH 2.5及3.0的環境下,發現A. aleyrodis NP001仍可在pH如此低的條件下生長。總的看來,A. aleyrodis NP001對pH之可耐受範圍甚為廣泛。
(二)相對濕度及紫外線對A. aleyrodisNP001之影響
蟲生真菌施用到田野後,自然光中的紫外線以及乾燥的環境明顯限制其蟲生真菌在田野中殘存及發芽的能力,更使得蟲生真菌在田野中的應用成效不穩定。其中紫外線為蟲生真菌施用後的一項重大限制因子,因此如何降低蟲生真菌受到之紫外線傷害,提高其存活率為應用時之重要考慮因素。油劑由於具有吸收紫外線之效果,因此被用於許多蟲生真菌之劑型化工作上(Moore et al. 1993, Alves et al. 1998)。當油劑加以乳化使用時,油滴呈小顆粒狀懸浮於水中,並將分生孢子包覆於油滴中,因此既能提供油劑之保護效果,又同時具有水懸浮劑之方便性,且乳化油劑本身亦可對小型害蟲達到物理性的防治功效。另外,各種油質所包含的成份不盡相同,包含有許多不同的脂肪酸、有機酸及phenolic acid等,這些成份對昆蟲寄生菌可能造成不同的影響。Barnes及Moore (1997) 利用上述之化學物質,進行對Metarhizium flavoviride之分生孢子發芽影響的試驗。其利用的有機酸類,如citric acid及salicylic acid,脂肪酸類,如succinic acid及eugenol等,分別將這些物質加入0.4至1%不等的濃度於製劑中,結果顯示了caprylic及capric acid這兩種脂肪酸對孢發芽具有百分之百的抑制效果,而eugenol、salicylic及lactic acid 都具有相當強的抑制效果,但是palmitic acid、linoleic acid及oleic acid等,則對孢子之發芽具有促進的效果。
在本研究中A. aleyrodis NP001分生孢子在未經由UV-B照射的情況下,接種後14小時即可大量發芽,發芽率達90%以上。經由46mJ/cm2的UV-B劑量照射A. aleyrodis後,對其發芽率產生相當明顯的抑制現象,即使觀察至48小時亦只有不到20%的發芽率。由於紫外線對A. aleyrodisNP001孢子之傷害相當顯著,因此進一步評估添加物對於紫外線之防護效果。將A. aleyrodisNP001 添加麥胚芽油、花生油、芝麻油及葵花油等油劑後,照射UV-B的A. aleyrodisNP001孢子於接種後48小時的發芽率由原先的17%提高到70%左右,顯示添加油劑確實可對紫外線防護達到一定程度的效果。然而,實驗發現添加油劑後,雖可在第48小時發現有明顯的發芽力,但整體而言,座殼菌孢子照射UV-B後,其發芽仍明顯延遲。這樣的現象對於田間應用來說仍是個不利的影響。在添加不同碳鏈長度之長鏈脂肪酸則發現大多可促進經紫外線照射後之孢子發芽速度。孢子照射紫外線後添加長鏈脂肪酸,可在接種後20小時,提高發芽率約20%。
在本試驗中亦利用Polyethylene Glycol 8000 (PEG8000)調整培養基水份活性(water activity, aw)介於99.6~89.6,並觀察A. aleyrodisNP001在不同水分活性環境下的孢子發芽率。接種後41小時,於aw99.6~97.7的環境中,發芽率良好且皆大於85%;但若aw低於96.7則發芽率明顯受抑制,在aw 93.8及89.5的條件下,則難以發芽,只有約20%不到的發芽率。此結果顯示A. aleyrodis NP001在相對濕度低於94%的情況下,發芽能力可能就受到相當大的抑制。
知識樹分類
消費者知識庫 > 農藝類
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