建立青脆枝毛狀根培養以生產喜樹鹼 - 農業知識入口網

 本研究利用農桿叢根菌AR281、AR1600與ATCC15834建立青脆枝的毛狀根培養系統。
農桿菌的轉殖率在不同菌種與單株間有很大的差異，以ATCC15834轉殖率最高，在接種的
10個營養系中，有7個營養系可成功誘導毛狀根，以H2營養系的莖段轉殖率在3個菌種都最
高，將毛狀根培養於不含有植物生長調節劑的MS培養基中生長快速且有很高的分枝性，具
有毛狀根的特性。選3個來自G1-4或H2接種ATCC15834產生之生長快速毛狀根進行鑑定與
培養，以PCR與南方雜交法確認農桿叢根菌的rol B基因已轉移至毛狀根。將3個毛狀根在MS
固體培養基培養40天，growth index為2.6~3.0，喜樹鹼含量為0.0537~0.1555% (乾重)。將
毛狀根移入液體培養基中培養，其生長比固體培養增加1.8倍，培養30天後，喜樹鹼產量為
9.8 mg/L，其中93.9% (9.2 mg/L)會從毛狀根系釋出於培養液中，因此可不斷收穫培養液提
煉喜樹鹼，對未來利用生物反應器培養是一項有利的生產模式。