健康馬鈴薯種薯繁殖系統之病毒檢測技術 - 農業知識入口網

馬鈴薯之生產方式係以無性繁殖種薯生產為主，在不諳病毒病徵及檢測技術之下，病害易藉由不健康的種薯傳播，造成田間的初次感染源，因此健康種薯的供應在產業發展上一直扮演著舉足輕重的角色，種苗改良繁殖場與動植物防疫檢疫局更為了輔導台灣馬鈴屬產業，積極推動馬鈴薯種薯病害檢定之驗證（圖1-2），而病毒檢測技術更是在維護健康種薯產程之重要關鍵技術。
植物病毒檢測診斷技術包括：病徵診斷法、生物檢定法、病毒內含體診斷技術、電子顯微鏡技術、血清檢定法與核酸檢測技術等等，各項病毒檢測技術比較（表1.）。目前種苗改良繁殖場已建立馬鈴薯包括PVS、PVX、PVY以及PLRV等病毒以酵素連結吸附免疫檢測(Enzyme-linked immune-sorbent assay, ELISA)之作業標準，並通過財團法人全國認證基金會（TAF）之試驗室及其相關技術認證（圖3.）。ELISA技術係利用抗體與抗原的專一性結合，經由標定於抗體上酵素之作用，將檢測結果以顏色變化呈現，輔以儀器讀取其吸光度數據，俾憑判斷正負反應。此技術具有快速、專一、方便及經濟等特性，適用於溫網室或田間大量樣品之病毒檢測。此外，核酸檢測法係建立於物種間獨特的核酸序列，依此序列設計出專一性核酸引子對，利用核酸聚合酵素連鎖反應，針對目標病毒的特定區域核酸進行快速複製，再經由電泳分析所增幅的核酸條帶進行判讀，對於植株體內病毒含量低於ELISA檢測值之篩選，敏感度甚高；種苗改良繁殖場正極力發展可於單一反應檢測2 種以上病毒的多目標型RT-PCR （multiplex RT-PCR ）技術研發，以節省檢測成本，2011年研發Multiplex RT-PCR技術，針對市場流通之馬鈴薯種薯進行PVA、PVS、PVX、PVY檢測，判斷過程迅速，非常適合馬鈴薯優良母本的快速篩選