宜花地區水稻徒長病發病情形、病原檢測與其對藥劑之感受性--材料與方法-3 - 農業知識入口網

（二）稻種帶菌率檢測
稻種帶菌率檢測方式，每1批稻種為1個樣品，每1樣品3重覆，每重複100粒種子，將稻種擺放於水稻徒長病菌之半選擇性培養基上，每皿培養基上放10粒種子，置於25℃生長箱中不照光7 d後，統計帶有徒長病病原菌落的種子數，帶菌率（%）計算方式為帶菌種子數/100×100。
使用修正Komada培養基之半選擇性培養基檢測稻種帶菌率，培養基配製方法如下：將下列之藥劑L-Asparagine（MP Biomedicals）2 g、D-Galactose（ACROS ORGANICS）20 g、KCl（聯工化學試藥）0.5 g、MgSO₄·7H₂O（J.T. Baker）0.5 g、K₂HPO₄ （Riedel-deHaen）1 g、Fe（EDTA）（Sigma）5 mg、Cycloheximide（Sigma-Aldrich）10 mg（1%）、chloramphenicol（sigma）200 mg·L^-1、Na₂B₄O₇·10H₂O（Sigma-Aldrich）溶於1 L蒸餾水中，以10%磷酸（Sigma-Aldrich）調整溶液至pH 4.5，再加入20 g洋菜粉（光惠股份有限公司）後滅菌，待培養基溫度降至50-60℃，加入Oxgall牛膽汁（Difco）0.5 g與Pentachloronitrobenzene（PCNB，中興大學提供）1 g，混合均勻後製成培養基平板。然因上述配方之PCNB藥品購買不易且具致癌性，後續利用許氏（許2013）所開發之FFC medium半選擇性培養基進行測試。
（三）秧苗罹病情形調查
每1批稻種樣品分別育苗3箱，3重複，每箱播種重量為250 g。將未經藥劑處理的稻種經5-7 d浸種，發芽後播種至育苗盤，3 d後移置育苗場綠化，當秧苗生長至10 cm時調查一次，同時將罹病株拔除，待生長至15 cm時再調查一次罹病株數，後將其株數加總後再進行平均，即為每箱育苗盤之罹病株數。