細菌性軟腐病菌之拮抗菌篩選及其病害防治效果評估--19
討 論
細菌性軟腐病可由多種果膠桿菌屬之病原菌造成,其中包括 P. carotovorum 和從 P. carotovorum 內亞種提升為種的 P. atrosepticum、P. betavasculorum 以及 P. wasabiae,然而除了 P. carotovorum subsp.carotovorum 有廣泛的寄主範圍外,其他三者的寄主範圍皆較為侷限(Lee et al., 2014 ),分別為馬鈴薯、甜菜以及辣根。而本實驗及前人研究(Yishay et al., 2008 )中發現,雖 P. carotovorum subsp. carotovorum 可感染單雙子葉等多科作物,但從交叉接種實驗的結果可推斷,自不同作物分離到的 P. carotovorum subsp. carotovorum 分離株,對其相對應作物的致病力較高,例如從彩色海芋分離到的 Pcc1 對彩色海芋有高致病力但對結球白菜的致病力則較低;反之,從結球白菜分離到的 Pcc4 則對結球白菜致病力高, 對彩色海芋致病力低。
國內外對拮抗微生物之篩選有諸多研究(Tan et al., 2013 ),亦已有多種微生物製劑商品化(Alejandro et al., 2011 ),而國內在防治細菌性病害的製劑研發上則較為缺少,僅一株由高雄區農業改良場研發之液化澱粉芽孢桿菌(PMB01)成功上市,因此本研究選擇由前述細菌性病害分離所得的 Pcc1、Pcc4 及 Dch 等菌株為對象進行拮抗菌 Bacillus spp. 之篩選及病害防治效果之探討,以供後續研發利用。Bacillus spp.為廣泛存在於土壤及根圈之微生物,本研究蒐集台灣宜花地區 807 處土樣,進行土壤稀釋平板,並利用拮抗圈大小以及螯鐵能力測試初選出 10 株拮抗細菌。接著,於實驗室生物防治試驗平台中,利用結球白菜切離葉、彩色海芋葉圓片以及蔥苗等接種法測試拮抗細菌對軟腐病的防治效力,篩選出防治效果最佳的 HL_B01 菌株。HL_B01 經由分子鑑定以及親緣關係樹建構,與 B. amyloliquefaciens, B. methylotrophicus, B. velezensis 此三群細菌親緣接近(Jeukens et al., 2015 ),然 HL_B01 之生理生化特性較接近 B. methylotrophicus 之標準菌株,可生長在以甲醇為碳源的礦物鹽培養基,並且具可分解甲醇之功能性基因methanol dehydrogenase structural gene。因此將HL_B01 鑑定為 B. methylotrophicus。本菌株為桿菌、好氧、具產孢能力,於國外已有許多防治植物病原菌的例子(Frikha-Gargouri et al., 2016;Jeyanthi et al., 2016 )。
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