家禽始基生殖細胞之冷凍保存 - 農業知識入口網

本試驗之目的在探討家禽始基生殖細胞(primordial germ cell, PGC)之冷凍保存方法，以了解利用超低溫方式冷凍保存家禽PGC之效果。試驗中分別探討以可程式降溫儀(WEST-4400)或簡易商用冷凍盒(Nalgene Cryo 1℃ Freezing Container)之不同冷凍設備，或在不同的雞血清(chicken serum, CS)添加濃度下(10－90%)，以及不同的解凍方式(A：解凍後以3倍體積逐滴加入含10% CS之M199 (Medium 199)，B：直接添加含10% CS之M199，C：直接添加含0.5 M蔗糖之M199)下對家禽始基生殖細胞之冷凍保存效果。結果顯示在以M199 + 10% DMSO (dimefhyl sulfoxide)為抗凍劑，冷凍體積為1 mL/瓶時，配合使用可程式降溫儀每分鐘降1℃時，細胞存活率為10－30%，優於每分鐘降0.33℃之存活率(低於10% )。若是利用商用簡易冷凍盒，每分鐘降1℃之降溫條件下，PGC解凍後存活率為47－54%，顯著優於可程式降溫儀的冷凍效果。冷凍保存液中不同雞血清含量對始基生殖細胞之存活率並未有顯著之影響。而冷凍之PGC最佳解凍方式則為於38℃快速解凍後，以3倍體積逐滴加入含10% CS之M199溶液。綜觀上述，利用Nalgene® Mr. Frosty® Cryo 1℃ Freezing Containers進行PGC冷凍保存似為簡便可行的方式。