建立豬誘導性多能幹細胞之無飼養層培養系統 - 農業知識入口網

本試驗利用Matrigel® 細胞外基質代替傳統幹細胞培養所使用之飼養層細胞，配合含有CHIR99021 與SB431542
之StemFit Basic02 與mTeSR1 幹細胞專用培養液( 培養液簡稱S+2i 與M+2i )，建立豬誘導多能性幹細胞(porcine
induced pluripotent stem cell, piPSC) 之無飼養層培養系統。結果顯示，S+2i 與M+2i 可維持piPSC 之細胞形態及高核
質比特性，顯示piPSC 維持良好的未分化狀態。細胞多能性抗原分析之結果顯示表現較強的Oct4、Sox2 與Nanog
標記，SSEA-1、TRA-1-60 與TRA-1-81 表現度尚可，然SSEA-3 與SSEA-4 表現相當微弱。基因表現結果中，多能
性基因表現皆有明顯的提升，其中又以S+2i 表現最佳。經S+2i 與M+2i 培養之piPSC 經誘導類胚體形成後，可於
體外分化為三胚層細胞且具GFAP、SMA 與AFP 等抗原表現，且皆可成功誘發形成畸胎瘤，然其於活體內之後續
三胚層分化能力仍相當有限。本試驗結果不但解決了以往需製備飼養層細胞之問題，此無飼養層培養系統之多能性
表現與可利用性，亦優於傳統飼養層培養系統，可供piPSC 長期培養使用。