草蝦弧菌Vibrio damsela之致病性研究 - 農業知識入口網

本研究以自罹病分離之弧菌Vibrio damsela (VD1 strain)進行其細胞外產物生化特性及毒性的研究，以了解本菌株對蝦類的可能致病機制。經肌肉注射結果顯示本菌株對草蝦之最小至死量分別為4.96*10(5)CFU/g蝦體重。以cellophane-overlay方法培養製備之細胞外產物對草蝦及斑節蝦最小致死量分別為0.53及9.21mg protein/g 蝦體重，由此結果可知草蝦較斑節蝦具感受性。細胞外產物對綿羊及草蝦血球皆具有溶血活性，以trypan blue 為染色劑，在改良之citrate/EDTA buffer 中測試對蝦血球中血活性，結果顯示細胞外產物對草蝦血球溶血活性為71.7hemcoytolytic units/mg protein。此外具磷脂酵素或性但僅具有微弱的蛋白分解酵素活性。細胞外產物經膠過濾層析(Gel filtration)做部分分離純化，其中所得部分純化毒素(GI fraction)具有溶血活性及磷脂酵素活性。以聚丙烯醯銨膠體電泳(polycarylamide gel electrophoresis PAGE)做純度鑑定，在native-PAGE的膠片上以硝酸銀染色，部分純化毒素具有4條分離帶。此部分純化毒素能使斑節蝦迅速致死。草蝦以活菌接種時在接種部位出現肌肉白酌，但注射細胞外產物及部分純化毒素則未出現此現象。