弧菌細胞外產物之研究-I弧菌細胞外產物對魚類之致病性研究 - 農業知識入口網

以含有1.5% NaCl之Brain Heart Infusion Broth 所培養之Vibrio anguillarum,經70%飽和硫酸銨加入上清液中萃取之細胞外產物為VA-0-70 ; 然後再加入飽和硫酸銨於上清波至80%,其萃取之細胞外產物為VA-70-80。以VA-0-70 測其理化學性狀得知具有hemolysin 和protease活性。對膜蛋白酶具有抵抗性, 但被過碘酸鉀所不活化。以及在121度C 加熱20分鐘, 其致病性完全消失。經SDS-聚丙烯醯胺膠體電泳分析結果顯示VA-0-70 及VA-0-70 通過DEAE-cellulose之D-II fraction 皆具有三種相同蛋白質, 其分子量為67K、37K 及21K。以VA-O-70 及VA-70-80分別行靜脈注射於小白鼠比較其毒性, 結果以VA-O-70 之毒性較強。VA-0-70 對小白鼠(IV)、鰻魚(IP)、泥鰍(IP) 及虱目魚(IP)等之半致死溫度(LD50)分別為155μg、375μg、>2000μg及59μg。虱目魚經VA-0-70 之注射後呈典型之紅斑病病徵, 即胸鰭、腹鰱及體側之體表呈現明顯出血斑、肝臟、腎臟及心臟呈局部壞死灶等。因此V.anguillarum 之細胞外產物實具致病性, 並且可能是紅斑病之主要致病因子。