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菌落雜交 colony hybridization method
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名詞釋義
以質粒為載體進行DNA克隆繁殖所用的方法,即從多數寄主菌的菌落中,將含特定的鹼基排列順序的DNA,通過與其鹼基排列順序互補的RNA或DNA雜交而進行檢出和選擇的方法。一般是使在瓊膠培養基上形成含有質粒的菌落後,在其上面壓附一層硝酸纖維素薄膜,將菌落移於薄膜上。用鹼處理同時引起溶菌和DNA變性後,在薄膜上各個群落的位置上分別將變性的DNA固定起來,然後與用放射性同位素標記的特定的RNA或DNA片斷雜交,再用放射自顯影法來鑑別含有所希望的DNA排列順序的寄主菌的菌落,最後從原來的瓊膠培養基上的菌落中選出其相應的材料。
補充解釋
5 則
達人
阿良 發表於 97/10/29
使用原位雜交來確定携带一個特定同源序列的插入DNA片段載體的技術。
高手
銘 發表於 97/10/29
菌落雜交(colony hybridization),使用一小段與目標基因同源,並且以放射性物質標記的 DNA 做為探針。探針可以使用限制酶切割片段,或用人工合成相同核苷酸序列。另外,若是以噬菌體 DNA 做為載體,也可以由溶菌斑來做為篩選的指標(此法稱為 plaque hybridization)。
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就是隨機選殖作物DNA片段來繁殖培養
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就是隨機選殖作物DNA片段來繁殖培養
達人
anemia 發表於 97/09/30
菌落雜交(colony hybridization),使用一小段與目標基因同源,並且以放射性物質標記的 DNA 做為探針。探針可以使用限制酶切割片段,或用人工合成相同核苷酸序列。另外,若是以噬菌體 DNA 做為載體,也可以由溶菌斑來做為篩選的指標(此法稱為 plaque hybridization)。
達人
美麗夜 發表於 97/09/29
菌落雜交(colony hybridization)
用以偵測含有特殊基因或某特定去氧核糖核酸序列之菌落的原位雜交技術。作法是在瓊脂培養基上,培養含有質體的菌體菌落,將硝基纖維素膜在菌落上面輕壓,使之部分轉移到膜上,再以鹼處理膜,使菌體溶解並使去氧核糖核酸變性,接著加熱使變性的去氧核糖核酸固定在膜上,然後以含放射性標記之探針溶液沖洗,使探針中之特定去氧核糖核酸或核糖核酸與質體的去氧核糖核酸雜交,形成具有雜交種的菌落。最後利用放射線自動顯影術顯像,就其呈現的黑點位置,便可在一群不同菌落中將含雜交種的菌落挑選出來。一旦確定菌落的位置,就可從瓊脂上取下菌落繼續培養,或將基因序列分離株作進一步分析。
用以偵測含有特殊基因或某特定去氧核糖核酸序列之菌落的原位雜交技術。作法是在瓊脂培養基上,培養含有質體的菌體菌落,將硝基纖維素膜在菌落上面輕壓,使之部分轉移到膜上,再以鹼處理膜,使菌體溶解並使去氧核糖核酸變性,接著加熱使變性的去氧核糖核酸固定在膜上,然後以含放射性標記之探針溶液沖洗,使探針中之特定去氧核糖核酸或核糖核酸與質體的去氧核糖核酸雜交,形成具有雜交種的菌落。最後利用放射線自動顯影術顯像,就其呈現的黑點位置,便可在一群不同菌落中將含雜交種的菌落挑選出來。一旦確定菌落的位置,就可從瓊脂上取下菌落繼續培養,或將基因序列分離株作進一步分析。
高手
小小珮 發表於 97/09/29
就是菌種相關測試、培養的方法。
菌落雜交試驗:將菌落進行雜交反應測試分析。
菌落雜交試驗:將菌落進行雜交反應測試分析。