巢式 PCR - 農業知識入口網

巢式PCR（nested PCR），是指利用兩套PCR引物（巢式引物）對進行兩輪PCR擴增反應。
在第一輪擴增中，外引物用以產生擴增產物，此產物在在內引物的存在下進行第二輪擴增。
由於巢式PCR反應有兩次PCR擴增，從而降低了擴增多個靶位點的可能性（因為與兩套引物都互補的引物很少）增加了檢測的敏感性；又有兩對PCR引物與檢測模板的配對，增加了檢測的可靠性。
一般應用於動物方面。如：病毒，梅毒螺旋體，HIV，腫瘤基因等

巢式PCR(nested PCR)是在普通PCR基礎上發展起來的一種PCR技術。其原理是設計兩對引物，其中一對引物在另一對引物擴增產物的片段上，通過二次PCR反應對某個基因進行檢測。
巢式PCR--可以減少假陽性的出現，而且可以使檢測的下限下降幾個數量級。在DNA受到嚴重破壞的大豆加工品豆油、大豆磷脂以及其它產品中，用普通PCR不能完全檢出是否含有大豆成分和轉基因大豆的成分，即使檢出，其重複性也不好。而利用巢式PCR可以克服普通PCR的這一缺陷。

同聚體並非良好的 PCR 引物，同時為了便於 RACE 產物的克隆，可向同聚體引物的5'端內加入一內切酶位點。所用的 cDNA 範本可以使用多聚 dT 引物延伸合成(3'，5'-RACE 均可)。當 RACE PCR 產物為複雜的混合物時，可取部分產物作範本，用另一條位於原引物內側的序列作為引物與通用引物配對進行另一輪 PCR (巢式 PCR )。早在1988年，FROHMAN 等即用此方法成功地獲得了4種 mRNA 的5'合3'末端序列。

巢式PCR（nested PCR），是指利用两套PCR引物（巢式引物）对进行两轮PCR扩增反应。
在第一轮扩增中，外引物用以产生扩增产物，此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。
由于巢式PCR反应有两次PCR扩增，从而降低了扩增多个靶位点的可能性（因为与两套引物都互补的引物很少）增加了检测的敏感性；又有两对PCR引物与检测模板的配对，增加了检测的可靠性。
一般应用于动物方面。如：病毒，梅毒螺旋体，HIV，肿瘤基因等