番茄‘花蓮亞蔬五號’以農桿菌法轉殖Bt基因之研究--結果-2 - 農業知識入口網

帶根的擬轉殖株持續在含抗生素的MS培養基中以微體扦插法繁殖，共有6個擬轉殖株，抽取葉片DNA後，分別以HindIII、AvaI、NcoI三種限制酶酶切，經電泳分離後將DNA條帶轉漬（transfer）到帶正電的轉漬膜上，經過與DIG探針雜合反應及顯影，南方雜合反應之條帶如圖一，轉殖株4號在3種酶切的南方雜合試驗顯示都沒有呈色條帶（圖一），表示其染色體組中沒有蘇力菌蛋白基因轉殖在其中，而轉殖株3、22及22-2號以相同的限制酵素酶切電泳經探針雜合的條帶數及條帶大小（電泳呈色條帶位置）皆相近，表示可能3、22及22-2號轉殖株之Bt基因應該插入番茄染色體同一個位置上，所插入的蘇力菌蛋白基因有3個複製數；而9及20號轉殖株所插入的蘇力菌蛋白基因有4個複製數，其中9號轉殖株以AvaI酶切之南方雜合圖顯示2.8 Kb的條帶較淡，但由HindIII、NcoI酶切之南方雜合圖皆為4條條帶，且與轉殖株20號酶切的電泳條帶形式相同，故9及20號轉殖株的Bt基因很可能插入番茄染色體同一個位置上，此兩者插入位置相同可視為同一個的轉殖品項（event）。而對照組（Wild type）並沒有呈色條帶出現，表示正常番茄植株並沒有此Bt基因存在。
圖一、番茄‘花蓮亞蔬五號’轉殖Bt基因植株南方雜合檢定