感染沙漠玫瑰的緬梔嵌紋病毒(Plumeria mosaic virus)之鑑定與檢測 - 農業知識入口網

2013 年高雄「大紅花」沙漠玫瑰，疑似病毒感染，經單斑接種於奎藜 (Chenopodium quinoa Willd.)，分離得到一個病毒純系的分離株DR-TW。經免疫分析顯示此分離株與雞蛋花嵌紋病毒 (Frangipani mosaic virus; FrMV) 及番茄嵌紋病毒 (Tomato mosaic virus; ToMV) 等菸草嵌紋病毒屬 (Tobamovirus) 的病毒抗體有交互反應。汁液接種番杏、紅藜 (Chenopodium amaranticolor Coste et Reyn)、奎藜、綠藜 (Chenopodium murale L.)、千日紅 (Gomphrena globosa L.) 及曼陀羅後都呈局部病斑，菸草、雞蛋花及沙漠玫瑰植株則形成系統性嵌紋，但對辣椒、番茄等茄科植物的病原性及致病力均弱於ToMV。以菸草嵌紋病毒屬廣效性引子對TobRT up1/TobRT do2 進行反轉錄-聚合酶連鎖反應 (reverse transcription-polymerase chain reaction; RT-PCR)，增幅出568bp 的核酸片段。經定序後與GenBank 中的核苷酸序列進行比對，結果顯示沙漠玫瑰台灣分離株 (DR-TW) 與緬梔嵌紋病毒 (Plumeria mosaic virus; PluMV) 的相同度高達98%。進行DR-TW 基因體定序，得核苷酸全長6,683 bp (GenBank accession number KX881422)，共轉錄出188.3 kDa 及130.4 kDa 的複製酶、28.7 kDa 的移動蛋白及19.0 kDa 的鞘蛋白。設計PluMV 專一性引子對 (PLuMVcp-up/PLuMVcp-dw)，經RT-PCR 可增幅出PluMV 的核酸片段643 bp，其他8 個供試菸草嵌紋病毒屬病毒則無。配合FrMV 專一性引子對FrMVcp-up/FrMVcp-dw，以RT-PCR 即可鑑別FrMV 及PluMV。