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番鴨誘導多能性幹細胞株之建立與水禽小病毒感染測試
作者:劉振發、張家語、曲鳳翔、陳立人
公佈日期:113 年 06 月 24 日
研究報告
27
本研究目的為建立番鴨誘導多能性幹細胞(muscovy duck induced pluripotent stem cells, mdiPSCs),並進行水
禽小病毒(waterfowl Parvovirus)感染測試,評估此細胞株作為疫苗生產之潛力。試驗利用慢病毒(lentivirus)將
LIN28, NANOG, SOX2, OCT3/4, KLF4 和 C-MYC 等轉錄因子轉染番鴨胚胎纖維母細胞(muscovy duck embryonic
fibroblasts, mdEFs),經約 7 -10 天後 mdEFs 逐漸由梭狀轉為圓形之上皮細胞形態,持續培養 35 -40 天後則形
成類似幹細胞群落形態。mdiPSCs 體外培養已超過 45 繼代(380 天),經分化多能性細胞標誌 AP 與 PAS 染色後呈
現陽性反應;使用懸浮小滴培養技術培養,具有形成類胚體(embryoid body)能力;顯示所建立之番鴨誘導多能性
幹細胞具有分化多能性與分化潛能。以聚合酶連鎖反應進行檢測,證實經水禽小病毒直接感染後之 mdiPSCs,及經
病毒感染 mdiPSCs 之回收細胞液共培養的 mdiPSCs,結果均呈陽性反應,證實水禽小病毒可感染本研究所建立的
mdiPSCs,並可以在其細胞內順利複製病毒顆粒,顯示本研究所建立的 mdiPSCs 可作為水禽小病毒宿主細胞及具疫
苗生產的潛力。
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