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可攜式即時核酸檢測平台技術驗證推廣(第1年/全程2年)
作者:鐘珮哲
公佈日期:115 年 02 月 05 日
本研究旨在驗證植物病害快篩行動箱(非動力式核酸萃取套組結合 LAMP 呈色法/螢光法)在草莓炭疽病與葉枯病檢測中的穩定性與應用效益。不同核酸擴增方式敏感度比對結果顯示,行動箱萃取法產生的核酸品質穩定度不佳,內生基因 Actin 條帶微弱或無法辨識,推測為核酸萃取效率問題;該核酸用於 LAMP 呈色法時,不論健康或接種葉片皆呈陰性,初步懷疑是試劑呈色穩定度不足。隨後改用 LAMP 螢光試劑檢測炭疽病,卻出現無論接種與否皆呈陽性的非專一性反應。葉枯病 LAMP 法開發中,雖然成功優化 LAMP 反應濃度,但使用快萃核酸進行第二次比對時,LAMP 反應全數失敗,且 Actin PCR 結果極差,nested PCR 敏感度亦受影響,顯示快篩箱的核酸萃取品質極度不均一,建議優先改善快篩箱人員操作流程以確保核酸品質及濃度,並加強田間試驗控制組設計以避免汙染。育苗場域應用成果顯示,透過快篩箱進行母株潛 伏感染檢測的精準防治模式,使育苗期(6-10月)炭疽病化學藥劑施用次數大幅減少至4次, 定植後植株補植率僅為0.5%,證明快篩技術能有效控管病原源頭,且能精準用藥與提升種苗品質效益。
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