臺灣酪梨上之Lasiodiplodia屬病原菌之新穎分子鑑定技術
Lasiodiplodia theobromae 與L. pseudotheobromae 為廣泛分布於熱帶與亞熱帶之植物病原菌,造成許多作物病害,但兩者不易透過傳統型態學方法鑑定與區分。本研究根據Lasiodiplodia 屬物種間之轉譯延長因子1-α (translational elongation factor 1-α; TEF1-α) 序列之差異性,開發了2 對物種專一性引子對 (Lt-F2/Lt-R1 與Lp-F/Lp-R2)。以基因體DNA 進行聚合酶連鎖反應,結果顯示Lt-F2/Lt-R1 與Lp-F/Lp-R2 分別對L. theobromae與L. pseudotheobromae具有專一性,對於非標的物種則均無擴增反應。使用此二引子增幅分離自臺灣酪梨 (Persea americana) 的54 株 Lasiodiplodia 菌株之DNA,成功自其中鑑定出屬於L. theobromae與L. pseudotheobromae的菌株,然有些菌株則無法被以上二對引子增幅,顯示臺灣酪梨上存在其他未知的Lasiodiplodia spp. 病原。進一步以TEF1-α、β 微管蛋白2 (β-tubulin 2; TUB2) 及 RNA 聚合酶II (RNA polymerase subunit II; RPB2) 之基因序列進行以上未知菌株之親緣分析,結果顯示另有L. thailandica、L. hormozganensis 及目前尚無法以此親緣關係鑑定的Lasiodiplodia物種存在於臺灣之罹病酪梨果實、枝條及果梗,經病原性試驗後顯示以上三者對酪梨果實均有病原性。本研究首次報導L. thailandica為酪梨之病原菌,且本研究開發之專一性引子將可於未來作為鑑別常見病原L. theobromae與L. pseudotheobromae的有效工具,有助於研擬正確防治策略。
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