利用昆蟲桿狀病毒表現載體系統生產魚類傳染性胰臟壞死病毒抗原 - 農業知識入口網

本研究利用生物技術的方法，產生傳染性胰臟壞死病毒抗原，以供疫苗之製備及抗體檢驗系統之建立。由於桿狀病毒表現載體系統是目前廣被利用為生產重組蛋白質之生物技術，因此本研究將IPNV A段基因的cDNA送入桿狀病毒表現載體系統中，以生產IPNV抗原。利用Hind III與Bam HI兩種限制黴，將A段基因自pT7-2/A中切出，並與桿狀病毒傳送載體pYPLT7黏合，再轉形入大腸桿菌DH5a菌株。利用限制?及DNA定序法分析，篩選出含IPNV SP A段cDNA之重組質體pAcIPNV-A，再與桿狀病毒基因體DNA共轉形於昆蟲細胞中，以生產重組桿狀病毒。分析感染重組桿狀病毒AcIPNV-A的SF21-AE昆蟲細胞中的蛋白質，結果可檢測到A段基因產物VP2及VP3。至於重組蛋白質中，亦應包括非構造蛋白質NS，不過因檢測用之抗體不含抗體NS之抗體，所以在分析結果中，無法觀察到NS蛋白質，開發檢測魚體中IPNV抗體之試劑組，以及重組病毒蛋白疫苗之製備。