利用PCR選殖菊花rDNA之內轉錄間隔區 - 農業知識入口網

設計一組引子(primer)，序列分別為IT1-5’CGTAACAAGGTTTCC3’和IT2-5’ AGTTTCTTCTCCTCC3’，可有效複製6個菊花品種(系)的5.8S核糖體核酸(rRNA)基因與內轉錄間隔區(internal transcribed spacer, ITS)，經聚合?○s鎖反應(polymerase chain reaction, PCR)複製產物長度為747 bp。將其中一品種的內轉錄間隔區進行定序，扣除兩端引子長度(30 bp)，總長為717 bp，與其他高等植物的相同區域比較，發現PCR產物有27 bp屬於18S rRNA基因的3’端，與52 bp屬於26S rRNA基因的5’端。因此，內轉錄間隔區實長為638 bp，此區包含ITS1、5.8S rRNA基因與ITS2等三區，其長度分別為253 bp、164 bp及221 bp。由上述研究証實，本研究之引子可藉由PCR技術，將各菊花品種(系)rDNA之ITS有效選殖，其中ITS1及ITS2為變異快速之DNA區域，可以由此獲得許多分子標誌，供未來應用於品種鑑別及新品種保護上。