香蕉基因組亞群華蕉系之原生質體培養 - 農業知識入口網

摘要 :香蕉華蕉系“ 北蕉 ”及“Robusta”兩參試品種，以幼雄花序衍生之懸浮細胞供當原生質體分離來源。混合酵素以cellulase2.5%．macerozymel.5%．driselaseO.5%及pectolyase Y23 0.1%組合，分離效果最佳，抽取效率依細胞團之類型而定，以橢圓體及平頭體、平頭伸長體(早期較佳。原生質體生產值可達 9.3 x 1百萬個/每克鮮重，球狀體次之為4.3 x 1百萬個/每克鮮重。原生質體接種密度以40萬個/每毫升以上，有利其胞型再生及生長。培養基含不同無機鹽類組合(Kao，MS，SH)之CP[Hl，MSB，SHl，皆可促使分裂生長。起始接種及持續生長於液體內，早期細胞生長受限。包埋於agarose則有利其細胞增生。植物生長調節物質 2,4-Dlmg/l，加或不加NAA0.5mg/l，Kinetin0.0lmg/l，均可以促使原生質體進一步分裂形成具有明顯胚柄及胚本體的原胚體，而大多數的原胚體可進一步分裂形成多胞體，少部分甚至可以發育至早期球狀體。植物生長調節劑NAA0.2mg/l，Kinetin0．1mg/l，Zeatin0.05mg/l，2iP0.2mg/l，則可以促使原生質體更快分裂在2個月內形成球狀胚。由“Robusta”懸浮細胞原生質體再生過程的觀察顯示，其顯然為原生質體直接發育成早期擬胚．而不必經過癒合組織的階段。至於目前之培養，至多只能達於早期球胚，其可能因持續Auxin(2,4-D)的存在有關。