利用分子標誌輔助研發低消化性蛋白之水稻品種--材料與方法-1 - 農業知識入口網

一、試驗材料
本試驗材料於2007年一期作以具有Lgc1突變之日本品種‘Shunyo’為母本，及‘台稉16號’為父本，於花蓮區農業改良場進行雜交授粉，並利用譜系法進行世代演進與選拔，至2012年獲得135個高度同質結合之F8世代族群，各品系於分蘗期剪取葉片，並於黃熟期分株收取榖粒，針對各品系之Lgc1突變進行基因型與外表型分析。基因型分析以Lgc1專一性分子標誌進行小片段序列增幅(PCR)，外表型以各品系收穫榖粒進行碾製精米後進行蛋白質電泳分析。
二、DNA萃取
針對135個F₈世代及兩親本品系為樣本，採取嫩葉80-120 mg，以液態氮磨碎後利用GeneMark Plant Genomic DNA Purification Kit 進行DNA 萃取，萃取得之DNA 以NanoPhotometer (Implen)光電比色計測定OD260/OD280之比值，並以OD260值計算DNA 濃度，分別稀釋成濃度為20 ng·ul^-1，以進行專一性分子標誌分析。