蝴蝶蘭細菌性葉斑病菌Burkholderia gladioli專一性引子開發 - 農業知識入口網

蝴蝶蘭細菌性葉斑病是由Burkholderia gladioli（BG）所引起的細菌性病害，本研究以100個逢機引子應用隨機增幅多型性核酸技術（RAPD）增幅，並篩選BG共有的650 bp之專一性片段，並根據其序列設計出對BG具專一性之引子組BGRPF3/BGRPR3。應用此引子組進行聚合酵素連鎖反應（polymerase chain reaction, PCR）偵測BG菌株皆能增幅出350 bp的片段，但對供試之8屬21種共97株其他非標的之病原細菌及腐生細菌則不會產生任何片段。BGRPF3/BGRPR3引子組偵測BG菌株的DNA靈敏度可達10 pg，菌落偵測之靈敏度則為1.87×10^1 cfu/ml個活菌數。將BG菌株與其他非標的細菌混合菌液經簡易萃取後進行PCR，只產生BG特有的350 bp片段。應用單一菌落快速檢定法可於3-4小時內鑑定蝴蝶蘭細菌性葉斑病菌。用於偵測人工接種BG病菌之蝴蝶蘭葉片以及田間自然發病之蝴蝶蘭葉片均具準確性，顯示本研究所設計之引子組BGRPF3/BGRPR3可用於快速鑑定蝴蝶蘭細菌性葉斑病菌。

參考文獻:COM/PUBLICATION/ALDETAILEDMESH?DOCID=10219544-201106-201305300026-201305300026-39-51