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利用真核系統表現豬第二型環狀病毒ORF 2蛋白
作者:王羣*;邱芮瑜;黃天祥;鍾明華;趙磐華;郭應誠
公佈日期:102 年 04 月 30 日
研究報告
2628
首先萃取台灣豬第二型環狀病毒(porcine circovirus type 2; PCV2)分離株之病毒核酸,然後利用聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR )增幅豬第二型環狀病毒之第二開毒窗(open reading frame 2; ORF2)基因全長片段。再將該基因片段植入表現載體中(pCI-neo),經篩選後,選擇嵌有該基因之重組質體,並將此重組質體轉染(transfect)至真核細胞(PK-15 cell line)內進行重組蛋白表現,並以間接免疫螢光法(indirect immunofluorescence assay, IFA)、聚丙烯醯胺膠片(SDS-PAGE)以及西方轉印法(western blotting)進行分析,可觀察到重組蛋白在真核細胞成功的表現出來。
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