栽培密度及耕作制度對丹參產量與有效成分含量之影響--材料與方法-2 - 農業知識入口網

三、丹參之指標性成分分析
（一）樣品處理：
丹參樣品以烘箱40℃緩慢乾燥，待完全乾燥後，以粉碎機磨成粉狀備用。
（二）樣品溶液製備：
秤取丹參樣品粉末1 g，加methanol 10 ml，以37℃萃取24 hr，再以0.2 μm濾膜過濾備用。
（三）樣品分析：
分析丹參之有效成分丹參酮IIA、丹參酚酸B之分析儀器為高效液相層析儀（High Performance Liquid Chromatography；HPLC），HPLC 型號為Waters 2695，光電二極體偵測器（Photodiode Array Detector）型號為：Waters 2998。分析管柱採HypURITY C18（250×4.6 mm），檢測波長為254 nm，樣品注射量為10 μl。分析方式採用梯度模式，沖提溶液分為：A：Acetonitrile；B：1% Acetic acid 水溶液；C：Methanol，起始時間A 25%，B 75%；15min時A 25%，B 75%；20 min時B 100%；25 min時B 100%，分別對不同溶液梯度濃度轉換；26 min時C 100%維持至30 min，流洗管柱中殘餘的化合物；31 min時換回起始條件A 25%，B 75%。丹參標準品丹參酚酸B、丹參酮IIA 購自臺灣默克股份有限公司（Merck Ltd., Taiwan）。