採收時間及遮陰對芥藍菜(Brassica oleracea L.)氮組成及硝酸還原酵素活性的影響－材料與方法 - 農業知識入口網

材料與方法
一、材料：
（一）供試品種：
芥藍菜[Kale (Brassica oleracea L. var. acephala DC.)]，購自農友種苗公司。
（二）養液製備：
採用Johnson的修正培養基(Johnson et al., 1957)，其配方如表一所示。
二、方法：
（一）水耕栽培與處理：
以20公升之塑膠桶，保麗龍板（60×45×3cm³）浮根式栽培（高，1991），每桶六株，每10日換一次水耕液，充分通氣，培養至約十葉齡，分控制組、停用硝酸態氮組和遮陰組三種處理。首日21:00收後開始處理，之後每六小時（3:00,9:00,15:00,21:00）採樣一次，每處理三重複，連續採三日。控制組以相同之水耕液繼續培養；停用硝酸態氮組以KCl和CaCl₂補足K_⁺和Ca_²⁺，其餘配方同控制組；遮陰組在翌日早上9:00以遮光55％的黑網遮陰，其餘同控制組。採收植體全株分葉片、葉柄、莖與根，稱鮮重，以液態氮急速冷凍，置於-70℃冰箱中保存；將樣品冷凍乾燥，稱乾重。
（二）植體分析
1.硝酸態氮之測定：
取0.2g乾燥植體，以50mL 1N HCl振盪抽取二小時，取5mL抽出液於三角瓶，加入40mL 0.7M 氨水、蒸餾水和1mL MnSO₄使其總體積為50mL，加入100mg鋅粉，振盪30分鐘過濾；取2mL濾液，加入46mL蒸餾水、1mL重氮試劑(diazoting reagent)和1mL偶合試劑(coupling reagent)，呈色30分鐘，標準溶液以50ppm KNO₃配製，使終濃度為0.04∼0.16ppm作標準曲線測，540nm吸光值(林與陳，1986)。