使用多重RT-PCR 檢測和區分3 種感染甜椒病毒 - 農業知識入口網

本研究利用多重反轉錄聚合酶鏈鎖反應 (multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction; multiplex RT-PCR) 方法，同時檢測與區分感染甜椒的3 種tobamoviruses，分別是辣椒輕斑駁病毒 (pepper mild mottle virus; PMMoV)、菸草嵌紋病毒 (tobacco mosaic virus; TMV) 及番茄嵌紋病毒 (tomato mosaic virus; ToMV)。使用1 種用於檢測所有tobamoviruses 的通用引子與3 種病毒專一性引子透過分析PCR 引子比率，對這3 種目標病毒的擴增進行調整。產生的PCR 產物由不同的片段組成：PMMoV 為519 base pairs (bp)，TMV 為228 bp 及ToMV為177 bp。本方法表現出高度的專一性，沒有與其他非目標甜椒病毒擴增產生特定的產物。此外，multiplex RT-PCR 已被證明是對檢測甜椒植物中多種tobamoviruses，為一種特異性、靈敏且經濟有效的方法。