栽培方式對黨參植株各部位的黨參炔苷及抗氧化能力之影響--材料與方法--06 - 農業知識入口網

（三）總酚類化合物含量（Total phenolic content）測定酚類化合物是普遍存在於植物中的重要天然產物，亦是植物化學成分中最大的族群，主要為植物的二級代謝產物，為天然植物中的多羥基酚類衍生物，常視為植物抗氧化力的指標。以Folin-Ciocalteu比色法測定試驗樣品中之總酚含量，其作用原理是酚類化合物中的苯酚（phenol）可以還原鉬（molybdenum），Folin-Ciocalteu試劑中的鎢鉬酸藉由自身被還原（Mo6+→Mo5+）而產生顏色變化，由黃色變為藍色，因此當樣品中的苯酚環愈多時，則酚基與Folin-Ciocalteu試劑反應後可產生愈多的藍色化合物，顏色深淺與總酚類含量呈正相關，Folin-Ciocalteu試劑與酚類化合物須在鹼性條件下反應才能顯色，而反應後的生成物在725nm下有較強吸光值，並以沒食子酸（gallic acid）為標準品做一定量檢量線，來測定試驗樣品中總酚類化合物之含量。沒食子酸在結構上，具有苯環接三個酚羥基團（phenolic OH groups）及一個羧基（carboxyl group）。

分別取50µl樣品萃取液置於塑膠96孔微量盤內，依序加入125µl10%Na2CO3（Merck Ltd.,Taiwan），震盪混合均勻，靜置2min後，再加入50µl50%Folin-Ciocalteu試劑（Merck Ltd.,Taiwan），最後總體積為225µl，震盪混合均勻後，避光靜置，於室溫下反應30min，並測量其在波長725nm下之吸光值，每一試驗樣品重覆三次，推算總酚類含量，並以沒食子酸的相對含量表示，計算其平均值及標準差。對應以沒食子酸為標準品之定量檢量線，換算試驗樣品每克乾重萃取物中所含相當於沒食子酸的毫克數（Bamba et al.,2018）。

沒食子酸（ChromaDex,Irvine,USA）之定量檢量線各點配製濃度為50、100、200、300、400µg/ml，沒食子酸檢量線之R2=0.9963[y=0.0043x+0.027,y代表吸光值;x代表沒食子酸濃度（µg/ml）]，單位以mgg-1DW表示。