花蓮亞蔬五號番茄農桿菌基因轉殖系統之建立--討論-1 - 農業知識入口網

討論
McCormik等人（1986）及Barg等人（1997）指出番茄基因轉殖時篩選再生培養基要添加高濃度BA （2.5mg/L）及低濃度IAA （1.0 mg/L）較為合適；而許多報告以添加zeatin 0.5-2 mg/L及IAA0.01-0.5mg/L作為再生篩選培養基之植物生長調節劑成分（Hamza and Chupean, 1993; Van Roekel et al., 1993; Park et al., 2003; Carolina and Francisco, 2004; Sigareva et al., 2004; Velcheva et al., 2005），Fillatti等人（1987）、Ling等人（1991）及Romero等人（2001）則在番茄基因轉殖之篩選再生培養基只添加高濃度zeatin（2 mg/L）即可獲得轉殖株。本研究結果顯示以MSG1、S1-1、B5三種培養基可使番茄下胚軸和子葉分化較多芽體，其中又以MSG1及BA5最適合，這三種培養基都是含高濃度的細胞分裂素如zeatin 1mg/L、BA 5mg/L或kinetin 2 mg/L，只有S1-1培養基另含NAA 0.02mg/L（表一），一般而言，植物組織培養要再生芽體都需要添加高濃度細胞分裂素（cytokinkin）配合低濃度細胞生長素（auxin），然而番茄下胚軸及子葉在只含zeatin 1mg/L或BA 5mg/L的培養基中即可獲得較多的芽體數，加上基因轉殖試驗中，芽體再生數也以MSG1共培養和再生篩選培養基處理較多（表二），推測花蓮亞蔬五號番茄之子葉和下胚軸培植體天然auxin含量較多，不需要額外外加NAA等auxin類之生長調節劑，結果與Fllatti等人（1987）、Ling等人（1991）及Romero等人（2001）的報告類似。
番茄利用農桿菌轉殖基因時之培植體大都使用葉圓片、節間、下胚軸或子葉，其中又以子葉的報告最多（Fillatti et al., 1987; Hamza and Chupeau, 1993; Van Roekel et al., 1993; Barg et al., 1997; Ling et al., 1998; Frary and Hamilton, 2001; Chyi and Phillips, 2001 ; Ellul et al., 2003; Carolina and Francisco, 2004）。Fray及Earle（1993）以下胚軸及子葉當作材料，認為下胚軸在基因轉殖後110天的再生芽數超過子葉培植體，而本試驗顯示在5週後下胚軸就有分化較多芽體的現象（表一），但若考量初期抗生素篩選會使培植體生長停滯或死亡的現象，篩選再生芽體時應選擇初期再生能力強的培植體，這也許是許多報告選擇子葉當作培植體的因素。