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花蓮亞蔬五號番茄農桿菌基因轉殖系統之建立--討論-4
作者:王啟正;林學詩
公佈日期:100 年 12 月 20 日
討論
在番茄以農桿菌轉殖基因研究中僅有少數在感染及共同培養基中以glucose取代sucrose (Shahin et al., 1986; Hamza and Chupeau, 1993; Sigareva et al., 2004; Velcheva et al., 2005),但沒有說明原因及討論,推測可能是跟農桿菌比較容易在含glucose溶液中生長及感染,額外添加glucose也可使MSG1ASG(表三)滲透壓增加,而使轉殖效率提高。
根據南方式雜合檢定,以NcoI及EcoRI酶切者出現兩個條帶,推測此轉殖植株轉進兩個基因序列(copy),而以AvaI酶切者有三個條帶的原因(圖四),可能是有大的DNA片段並沒有被AvaI酶切乾淨,造成未被切開之長片段被放射線探針雜合而顯像所致。
本轉殖試驗產生之轉殖基因番茄根、莖、葉、花、果實以X-Gluc化學染色法及PCR檢定,確認為全株可表達GUS基因之轉殖株,沒有嵌合體轉殖株,顯示此轉殖技術可應用在番茄基因轉殖。
根據以上結果所示,花蓮亞蔬五號番茄以農桿菌進行基因轉殖的技術已經建立成功,目前正以此技術進行番茄的Bt基因轉殖,相信此技術可提供未來更多的功能性基因轉殖於番茄上表達,以改進現有番茄的性狀。
知識樹分類
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