花蓮亞蔬五號番茄農桿菌基因轉殖系統之建立--討論-2 - 農業知識入口網

討論
Nauerby等人（1997）及Chang等人（1998）認為菸草培植體與農桿菌共同培養後時以Timentin殺農桿菌的效果比常用的cefotaxime或carbenicillin為佳，而且所再生的芽體數也較多，以番茄進行基因轉殖時使用Timentin也有相同之效果（Ling et al., 1998），Costa 等人（2000）進行4個番茄品種子葉組織培養，顯示於培養基添加Timentin 300mg/L可使其中3個品種增加再生芽體數，本試驗顯示番茄子葉切段組織培養時添加Timentin 150mg/L對再生芽體數並沒有顯著促進的效果，可能是Timentin對花蓮亞蔬五號番茄的增加再生芽體效果不佳所致。
Fillati等人（1987）指出番茄基因轉殖時之農桿菌濃度會影響轉殖效率，最適合濃度為每mL有5×10⁸個農桿菌為佳（O.D_.600約為0.8），Fary及Earle（1996）結果顯示O.D_.600等於0.4時可使轉殖效率達到10.6％，Ellul等人（2003）也將共培養菌液濃度減少到每mL有10²-10³個農桿菌（O.D_.660＝0.1-0.15），使番茄品種p73的轉殖效率從2.5％提高到11.2％。本試驗結果顯示高菌液濃度（O.D_.600＝ 0.8-1.0）轉殖效率較差，將菌液濃度減少到O.D_.600 ＝0.6-0.8時可提高轉殖效率。
在感染時間對轉殖效率的影響方面，並沒有報告針對探討此因子，Fillati 等人（1987）、Hamza 及Chupeau （1993）、Ling等人（1998）的步驟為30分鐘，而McCormik等人（1986）、Barg等人（1997）的試驗中只將培植體切口與感染菌液浸濕即可進行共培養，本試驗結果則顯示以30分鐘為佳（表二）。