嵌紋病毒鞘蛋白抗血清之製備及其於病毒檢測之應用 - 農業知識入口網

臺灣中部地區為鮮食麻竹筍的重要產區，近年來產區受到竹嵌紋病毒(bamboo
mosaic virus, BaMV)感染，影響品質與產量，且有愈來愈嚴重之趨勢。本研究自臺中市大
坑地區麻竹栽培園採集帶有嵌紋病徵的植株葉片後，以前人製備之BaMV 鞘蛋白(coat
protein,CP)抗血清(anti-BaMV-CP serum)檢測後，判定為BaMV 罹病樣品。進一步抽取罹
病樣品之全量核酸，以GenBank 中已知BaMV-CP 基因序列所設計之引子對進行反轉錄
聚合酶鏈鎖反應(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)，增幅出與預期相
符約750 bp 之DNA 片段。此DNA 片段經選殖、定序及分析後，顯示其核苷酸序列與
GenBank 上已登錄之BaMV CP 基因相同度(identity)大於72%，對應的胺基酸序列之相同
度大於80%，確認為BaMV 之CP 基因，並將此CP 基因來源的病毒定名為BaMV 大坑
選殖株(BaMV-DK)。為製備高專一性的BaMV 抗血清，以pET 系統在E. coli Rosetta (DE3)
內大量表現BaMV CP，並將純化蛋白免疫兔子後生產BaMV 之抗血清(RB2025-BaMV 及
RB2026-BaMV)，具高度專一性，可於田間樣品偵測到BaMV，將做為生產無BaMV 種
苗有力的偵測工具。