營養管理對葉菜甘藷產量及抗氧化力之影響--材料與方法-3 - 農業知識入口網

材料與方法
3. 鐵離子還原抗氧化力 FRAP測定
參考張（2008）之方法經部分修正而成，FRAP分析試劑包括：300 mM醋酸緩衝溶液，pH 3.6；10 mM 2,4,6-tripyridyl-s-triazine （TPTZ）（Sigma-Aldrich, St. Louis, USA）溶於40 mM HC1（Merck, Germany）中；20 mM FeCl₃ ·6H₂O（Sigma-Aldrich, St. Louis, USA），試劑在實驗前依體積10:1:1 之比例混合後，置於37℃水浴槽中備用。
先在分光光度計的石英管中加入900 μl FRAP反應液，再將30 μl 樣品萃取液分別注入管中，混合後置於室溫4分鐘，再以分光光度計量測600 nm波長之吸光值（A600nm），並以0、400、800、1200、1600及2000 μM維生素C（Sigma-Aldrich, St. Louis, USA）作標準品檢量線。
（三）多酚含量測定
參考調整Rowena 等（2009）的方法，取樣品萃取液0.15 ml加入0.15 ml Folin & Ciocalteus’s 1N phenol reagent（Sigma-Aldrich, St. Louis, USA），混合均勻後靜置5分鐘，再加入1.5 ml 之10%碳酸鈉溶液，於室溫避光環境下靜置反應30分鐘後，吸取上清液，以分光光度計量測760 nm波長之吸光值（A760nm），並以0、300、600、900、1200及1500 μM Gallic acid（Sigma-Aldrich, St. Louis, USA）作標準品檢量線。