宜花地區野菜資源盤點與營養價值初探--05 - 農業知識入口網

（四）營養成分分析方法

1.蛋白質

蛋白質含量是採用凱氏氮定量法（AOAC 方法 979.09；AOAC，1990），以濃硫酸消化後，再使用硫酸銅或過氧化氫作為催化劑，將有機氮轉化為氨，並將蒸餾所釋放出的氨收集到硫酸溶液中，蒸餾液以氫氧化鈉溶液滴定，以測定硫酸溶液中所吸收的氨，蛋白質 （%）含量依所得的氮（%）乘以 6.25 計算。

2.粗纖維（酸鹼洗滌法）

乾燥樣品置於濾袋中，以 1.25% H2SO4 及 1.25% NaOH 各煮沸 30 min，並進行乾燥及灰化， 紀錄灰化前後重量，依AOAC, 1975 之方法測定之。

3. β-胡蘿蔔素

冷凍乾燥樣品加入水及丙酮萃取，萃取液以氮氣吹乾，回溶於四氫呋喃及甲醇混合液，並以HPLC（alliance 2695+ 996, Waters,  美國）測定之。

4.維生素C（Ascorbic acid）

新鮮樣品經偏磷酸醋酸液萃取後，加入 2,6-二氯酚靛酚鈉溶液 （DCPIP）及 2,4-二硝基苯腁（DNPH）溶液，在酸性條件下呈現黃橙色（Pelletier, 1985），呈色進行分析定量，於 37℃水浴振盪 3 h，以分光光度計（U-2001, Hitachi, 日本）波長 520 nm 測定吸光值。

5.總酚

依Folin-Ciocalteu reagent(Folin & Ciocalteu, 1927）測定總酚含量，分別以 1.0 g 新鮮樣本：4 ml 甲醇均質萃取成樣液，取樣品液及Chlorogenic acid 標準品溶液 0.2 ml 置於個別的試管中，依序加入 3.2 ml 二次蒸餾水，0.2 ml 1N Folin-Ciocalteu’s phenol reagent，0.4 ml Na2CO3 飽和溶液，以振盪器（OS701, Orbital, 台灣）混合均勻，待充分反應 30 min 後，以分光光度計（U-2001, Hitachi, 日本）波長 760 nm 測定其吸光值。

6.鈣及鋅

鈣及鋅含量的測定是經過灰化過程及硫酸稀釋（AOAC 方法 975.03，AOAC，1990），以原子吸收光譜儀（Z-6000, Hitachi, 日本）測定之。

7.鐵

將 0.3 g 的樣品與 5 ml 硫酸混合，放至 300℃的蒸煮器中 2-3 hr，加入 2 ml 的 30%過氧化氫（H2O2），再置於 300℃的蒸煮器中使其透明，用水稀釋至 50 ml，以原子吸收光譜儀（Z-6000, Hitachi,日本）測定 Fe 含量。

8.葉黃素

冷凍乾燥樣品 0.1 g 加入水及丙酮，混合震盪 30 min 後，取 2.0 ml 上清液加入四氫呋喃及甲醇混合液，並以HPLC（alliance 2695+ 996, Waters,  美國）波長 450 nm 測定之。

9.草酸鹽

冷凍乾燥樣本 0.1 g 放入離心管中，加入 1.8 ml 己烷，以 13,000 rpm 離心 5 min，上清液被丟棄，重複步驟 3 次。將沉澱用蒸餾水沖洗後，加蒸餾水至 10 ml，並震盪 1.5 h，取 1.5 ml 液體， 通過 0.45μm 膜過濾並以HPLC（alliance 600 +2996+ Differential Refractive 410, Waters, 美國）測定之。